المصدر: سؤال عاجل عن الHPLC في منتدى : قسم الكيمياء أشتغلت على جهاز ال HPLC وعندما انتهيت من الrun ظهر الكروماتوجرام وبه peaks على شكل قاع محتويا على الbaseline كما هو موضح بالصورة هل الفصل صحيح أم خاطيء أرجو إفادتي وأين يكمن الخطأ وجزاكم الله خير الجزاء
الاخت الكريمه بعد السلام عليكم اذا كنتى عضوة جديده نرجو المشاركة فى 5 مواضيع على الاقل ولو بالشكر للكاتب فى الايقونه التى تظهر على شمال الصفحه بعدها تظهر لك المرفقات وتستطيعى رفع صورك من مركز رفع الملفات الموجود فى التول بار العلوى ثم ارفعى صورة بشكل البيك وحددى اى نوع من المواد تفصلين والتيم لكل بيك واى جهاز تستخدمين ليس اسم الشركه بل هل تستخدمين البوست كولم فى معالجة العينه بعد الفصل وقبل دخولها على الديتكتور ام لا وما نو ع الديتكتور المستخدم وان كان لديك شكل للبيك الاستندر المفترض ان تطلع ياريت ترفعيه للموضوع فانا اعمل على الجهاز فى فصل المواد العضويه من المياه وربما افيدك ويمكن ان تدخلى على موقع الشركه المورده للجهاز وتبحثى عن ابلكيشن للمواد التى تفصليها وشكل البيك ربما تجدى طلبك للعلم انا خبرتى فى المياة وتطبيقاتها مع هذا الجهاز اللهم قد بلغت اللهم فاشهد وبالتوفيق ولو اردتى شىء اتركى الرد هنا او ادخلى على صفحتىمن هنا واتركى رساله زائر والسلام (inlove) (inlove) (inlove)
جزيت خير الجزاء على اهتمامك بسؤالي ولكن أنا أرسلت الشكل الي يوضح الكروماتوجرام وجهازي لا يحوي على بوست كولم وبالنسبة للديتيكتور فهو عبارة عن uv/vis وطبيعة شغلي على الكوانتيتاتيف حيث أني أريد فصل مادة ثانوية من نبات وهدا أول كروماتوجرام أتحصل عليه حيث أني لم أتعرف بعد على المواد بالاستاندرد لدا أود معرفة مدى صحة عملي على الجهاز ومدى صحة النتيجة (الكروماتوجرام) هدا هو الرابط الدي يحوي الكروماتوجرام
بسم الله الاخت الكريمه رأيت الكروماتوجرام وعملت من قبل على جهاز يحتوى نفس الديتكتور ولكن لجهاز يستطيع فصل المواد ويعطيك مساحه كل بيك وزمن خروجها ولكن لا يستطيع تحديد تركيز اى بيك تخرج الا اذا ادخلت له الزمن الذى تخرج عنده البيك واسمها وذلك من خلال ادخال استندرات له وعمل معايره (يعنى ليس HPLC mass) لذا عند فصل عينات عليه انا اعرف مقدما ان البيك بتاع الماده( a ) مثلا هتخرج بعد زمن (3) دقائق مثلا والماده ( B) هتخرج بعد( 5) دقائق من الرن وهكذا باقى المواد فلو هفصل عند طول موجى معين خليط من 6 بيك انا اعرف الزمن لكل بيك اللى هتخرج عنده وعلشان كده اقدر اعرف انها اتفصلت او لا وعلشان اعرف تركيزاتها ادخل للجهاز استندرات من الخليط اللى انا عايز افصلة بتركيزات مختلفه واعمل معايرة وعندما ادخل عينه مجهوله له علشان يفصل لى المواد اللى انا عارفها ربما يجد المادة دى بها 10 بيكات وانا اعرف 6 منهم كل بيك من الزمن اللى تخرج عنده لذا اقوله تجاهل البيكات الاخرى عدا ال6 اللى انا عارفهم فبكده يحسبلى تركيز البيكات السته بتوعى ويعتبر الباقى ملوثات للعينه اما اذا كان جهازك يعمل كمكا شرحت فانت خير من يعرف هل الفصل صحيح ام لا وللتاكيد حضرى تركيزات متضاعفه من العينه اللى بتفصليها و اجعلى الجهاز يفصلها وشوفى مساحه كل بيك خارجه لكل تركيز ولو لقيتى مثلا البيك اللى بعد دقيقتين بتخرج كان مساحتها فى التركيز 1 هى 5 ونفس البيك اللى بعد دقيقتين بتخرج كان مساحتها فى التركيز 2 هى 10 وهكذا بزيادة التركيز تزداد مساحة البيك بشرط عدم تغير شكل البيز لين فى كل التركيزات المفصوله يبقى الفصل تمام ومن الاستندرات والمعايره هتعرفى التركيزات اما لو عان جهازك كما اتوقع HPLC mass يعنى يفصل العينه اولا ومن كتلتها الجزيئيه يحدد نوعها ثم من المعايرة يحدد تركيزها فأنا لم اعمل عليه من قبل ممكن تدخلى على اى من المواقع الاتيه وتبحثى عن ابلكيشن على نفس الجهاز خاصه بالماده التى تفصليها يمكن تلاقى طلبك ثم اعملى سيرش لاعلى تطبقات HPLCفى المجال الذى تبحثين عنه لانه لن يستطيع احد مساعدتك بدون معرفة ماذا تفصلين وماذا تتوقعين الحصول عليه وهذه صورة الكروماتوجرام اللى طالع معاك لمن يحب يساعدك رفعتها لكى وهكذا اكون عملت ما استطيع وبالتوفيق
الاخت الكريمه بعد السلام عليكم للحصول على مساعده اعيدى تحميل شكل الكروماتوجرام ثانيه وضعى الرابط هنا او حوليه لصوره وارفعيه هنا ثم ادخلى على موقع الشركه الاتيه وابعتى لهم ايميل بلموضوع بتاعك بالانجليزيه وبالتوفيق ولو احتجتى اى استفسار انا تحت امرك اتركى الا ستفسار هنا وانا اجاوبك
هذا هو الكروماتوجرام الذى ظهر لاختنا الكريمه ومن يستطيع الاجابه فعليه التكرم بترك اجابته هنا وانا سأحاول سؤال من هم ا كثر خبره وعمل على جهاز ال HPLC mass واسوف اترك اجابتى هنا (inlove)(inlove)(inlove)
وانت اخى الكريم بارك الله فيك على مواضيعك الكثيره والجميله وشكرا لتشجيعك ولاتنسى ان هذا التعاون من ديننا وكان الله فى عون المرء ما كان المرء فى عون اخيه اما اختنا الكريمه صاحبة الموضوع فهذا فصل الخطاب فى الكلام لقد حملت الكروماتوجرام الخاص بك وعرضته على وكيل اكبر الشركات العالميه فى اجهزة الHPLC وهو وكيل شركة waters فى مصر حين كانو لدى فى عملى وحملت لهم رسلتيك فأفتونى انك تعملين على جهاز HPLC عادى وليس mass وان ما حصلتى عليه ليس فصل أطلاقا بل مجرد ملوثات فى العينه وانك يلزم ان تعرفى معلومات اكثر عن الماده التى تفصليها و تفصل عند اى طول موجى وخلافه تغيرى الconditions التى تدخليها للجهاز من طول موجى و ونسب خلط الموبيل فيس وغيرها للحصول عى فصل افضل لان مالديك ليس فصل . وهذا ما استطيعه وياريت تردى هنا حتى اشعر ان ودمت فى حفظ الله والسلام (inlove)(inlove)(inlove)
شكرا لكل من ساهم في حل مشكلتي لقد عرفت الحل ببساطة كانت المشكلة في الميثود الدخلة وفي تحضير الموبايل فيز حيث عندما فصلت العينة وطابقتها بالاستاندردز استطعت تعريفها جزاكم الله خيرا