شغف العلم
Member
السلام عليكم ورحمة الله
لدي مشكلة عند إستخدام الإلكتروفوريسيس للـdna و عملت نفس الطريقة المذكورة في الأبحاث لكن ما تطلع معي أي نتيجه
الفكرة إني أفصل منطقة معينة من الـdna بعد عمل تضخيم لها بواسطة الـpcr عند تحضير 2% من جل الأجاروز
المشكلة إن الجهاز الي عندي كبير 2% من التحضيرة ما تغطي كل القالب ويطلع سمك الجل مره صغير
لما ضاعفت الكمية وضعت 4جم من الأجاروز في 200مل من البفر ومشيت عليه العينات ماطلعت أي نتائج
المشكلة الي محيرتني
1- لما تمشي العينه على الجل (20ميكرو ليترمن الـdnaو 5ميكرو من الصبغه) يختفي لون الصبغه ولما أضع الجل على الuv لا أري أي باند.(فين راحت العينات؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟
)
2-حتي الماركر يطلع مرة مغبش ومو واضح
ولا أدري أين هي المشكلة
ما الحل ؟؟
;(
وشكرا
وهذا رابط صورة الجهاز
http://www.americaninstrument.com/eq...4B-ELECTRO.asp
http://www.fishersci.com/wps/portal/...ll&fromSearch=
لدي مشكلة عند إستخدام الإلكتروفوريسيس للـdna و عملت نفس الطريقة المذكورة في الأبحاث لكن ما تطلع معي أي نتيجه
الفكرة إني أفصل منطقة معينة من الـdna بعد عمل تضخيم لها بواسطة الـpcr عند تحضير 2% من جل الأجاروز
المشكلة إن الجهاز الي عندي كبير 2% من التحضيرة ما تغطي كل القالب ويطلع سمك الجل مره صغير
لما ضاعفت الكمية وضعت 4جم من الأجاروز في 200مل من البفر ومشيت عليه العينات ماطلعت أي نتائج
المشكلة الي محيرتني
1- لما تمشي العينه على الجل (20ميكرو ليترمن الـdnaو 5ميكرو من الصبغه) يختفي لون الصبغه ولما أضع الجل على الuv لا أري أي باند.(فين راحت العينات؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟
2-حتي الماركر يطلع مرة مغبش ومو واضح
ولا أدري أين هي المشكلة
ما الحل ؟؟
وشكرا
وهذا رابط صورة الجهاز
http://www.americaninstrument.com/eq...4B-ELECTRO.asp
http://www.fishersci.com/wps/portal/...ll&fromSearch=